微生物组高级

微生物组 16S 数据分析流程

从 16S 扩增子测序数据和样本信息表出发,完成质控、特征表生成、多样性分析、差异分析和可视化。

预计耗时:1-2 天 5 个步骤

操作步骤

1

准备数据和 metadata

QIIME 2

整理 FASTQ 文件、样本分组信息和实验设计表。

metadata 的样本编号必须与测序文件严格一致。

2

质量控制

QIIME 2 / DADA2

完成序列质控、去噪、去嵌合体和特征序列生成。

截断长度要结合质量图决定。

3

构建特征表

QIIME 2

生成 ASV/OTU 特征表,并进行物种注释。

物种注释数据库和版本需要在论文方法中说明。

4

多样性分析

QIIME 2 / R

计算 Alpha 多样性、Beta 多样性和群落结构差异。

统计检验要与分组设计匹配。

5

差异菌群和可视化

R / Phyloseq

进行差异丰度分析,并绘制组成图、热图、PCoA 和箱线图。

差异结果要结合生物学意义解释。

流程完成